【正文】  1．问题的提出
　　人教版生物选修一《生物技术实践》专题5课题3“血红蛋白的提取和分离”，通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，让学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解凝胶色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理，教学难度极大。同时历年新课标高考对此课题考察极少，甚至是盲区，因而极有可能成为未来命题的热点，笔者结合教学实践，精心命制几道原创题，供同行商榷参考。
　　2．几道原创题
　　2.1例1 
　　凝胶色谱技术不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。下图甲为凝胶色谱柱分离蛋白质的示意图，图乙为几种被分离蛋白质相对分子质量大小与洗脱液的洗脱体积的关系，请据图分析回答：
　　（1）图甲所示的分离蛋白质的方法是　　            　　，a，b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是　　               　　，原因是　　         　　。










　　（2）装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是
　　                                                                          　　。
　　（3）若图乙被分离的蛋白质混合液中含有肌红蛋白（相对分子质量为16 900）、血清蛋白（相对分子质量为68 500）、牛乳球蛋白（相对分子质量为35 000）、牛胰岛素（相对分子质量为5 700），则图乙中A、B、C、D代表的物质依次是　　                                 　　。
　　答案：
　　（1）凝胶色普法　a    a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快
　　（2）气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
　　（3）牛胰岛素、肌红蛋白、牛乳球蛋白、血清蛋白
　　命题创新点：结合曲线重点考察凝胶色谱法分离蛋白质的原理。
　　2.2例2
　　已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如下图所示。








　　（1）若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，蛋白质的相对分子质量M与洗脱体积的关系如下图所示，曲线上的每个圆圈代表样品中的一种蛋白质，样品中的5种蛋白质分别以A、B、C、D、E表示，则图A与图B中正确的是图　            　　，A、B、C、D、E分别对应甲、乙、丙、丁、戊中的　            　　 （在甲、乙、丙、丁、戊中选择填入）。










　　（2）用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量时，所测得的结果　            　　蛋白质的相对分子质量（填“就是”“不是”或“不一定是”），因为　                                                      　　
　                                                      　                                　。
　　答案：
　　（1）B          丙、丁、乙、戊、甲
　　（2）不一定是      如果蛋白质有多条肽链组成，在SDS的作用下会解聚成单条肽链，这样测定的结果只是单条肽链的相对分子质量
　　命题创新点：结合蛋白质分子量与洗脱体积的关系曲线，深度考察凝胶色谱法分离蛋白质的原理以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量的原理，设计新颖简洁。
　　2.3例3
　　某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的提取分离流过程分为四步：样品处理、蛋白质粗分离、纯化、纯度鉴定。据此过程请回答下列问题：
　　（1）蛋白质粗分离常用方法是透析，透析的原理是：      　           
      　                   。
　　（2）蛋白质纯化常用的方法是凝胶色谱法，凝胶装填完后，立即用洗脱液洗脱的目的：      　                                                         。
　　（3）电泳是蛋白质纯度鉴定的常规方法。下图是几种蛋白质通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱，据图分析，你认为相对分子质量最大的蛋白质是      　                   。该样品中在凝胶色谱法中洗脱时最后流出的蛋白质是       　                   。     






　　答案：
　　（1） 透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。
　　（2） 使凝胶装填紧密     （3）E；A
　　命题创新点：结合电泳图，深度考察SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量的原理。